双尾虫史前怪兽 电影是第几集

双酶切片段怪异,请求各位大侠帮助~ - 分子生物 - 小木虫 - 学术 科研 第一站
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双酶切片段怪异,请求各位大侠帮助~
下面是双酶切图片,从左往右依次为:BamHI单酶切;EcoRI单酶切;两个酶双酶切;质粒对照;最近一直在双酶切但是没有产物,然后酶啊,Buffer啊都有换过,是用的feramentas的快酶和Takara的都有试过,质粒也有换过新的,但是一直切不出来,请问各位有没有遇到过这种情况,该怎么办?急急急~
一直切不出来是什么意思?
看胶图,切得挺好的啊? 再切不出来就PCR扩吧。一对引物也花不了多少钱。 酶切位点有没有突变? 确定质粒上只有一个酶切位点么,是否BamHI,EcoRI的位置太近?
最适酶切条件是
Buffer 2X Tango™
2-fold excess of BamHI
Incubate at 37°C 楼主应该把marker那里标识一下 质粒对照浓度那么低
还有,为什么你单酶切时两个结果大小不一样 : Originally posted by congfei123 at
一直切不出来是什么意思?
看胶图,切得挺好的啊? 切不出我的条带;下面什么都木有 : Originally posted by hajierlove at
酶切位点有没有突变? 查过好几遍了,没有突变 : Originally posted by korchagin at
质粒对照浓度那么低
还有,为什么你单酶切时两个结果大小不一样 我也解释不了 两个单酶切的片段大小不一样,应该检查检查酶切位点了,很可能是引入了另外的EcoRI位点了 点样量至少也要100ng吧,太少很难判断的。而且质粒一般都是两条带,都看不出你质粒的第二条带···而且你的着色试剂是不是弄多了,底色太亮了··· 你测序了吗??? : Originally posted by alicelchf at
你测序了吗??? 测了,没有错误 你要的产物是多少bp,如果比较小,建议多切一点质粒,并且酶切过夜。上样检测时,增加上样量。可以先ecor1单切,多切一点,割胶回收后,再用bamh1进行酶切,最后上样检测。 建议质粒浓度大一点,直接双酶切过夜 如果BamHI和EcoRI都是单酶切,那么恭喜您, 您的质粒是错误的;非常明显的两个单切的线性化带大小不一致。你所说的测序应该是说测过要切下来的序列;如果测序结果包含了两个酶切位点,那么这2个酶轻松切开,非常常见的2个酶,又不用担心甲基化什么的。如果有什么详细的私信我吧! 两个可能的原因:1)质粒浓度太低,目标片段看不到;2)空载体。当然,上述判断基于所有试剂和操作都是正确的 一定要测序确定酶切目标序列,此外质粒骨架序列也应清楚!
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触角念珠状内藏的咀嚼式没有复眼和单眼色体长2-20毫米我国西藏有一种铗尾虫体长竟达49毫米为世界所罕见体白色或黄色前小中后胸相似跗节1节有2-3爪腹部11节前7节有成对的刺突和泡囊尾发达其中尾须线状的种类叫尾须骨化成钳状的种类叫铗尾虫仿陈瑞瑾图本目有时被提升为双尾纲界动物界属铗尾虫属
iplura 铗尾虫世界上已知约600种我国已记载近40种本目昆虫生活在不同深度的土壤中或在潮湿的地方石头下朽木下枯下或落叶下怕见光取食腐殖质菌类或微小的动物
本目的特征可以总结为
无眼双尾目如念珠尾须或尾铗一七泡刺突[1]
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