1、在用紫外吸收检测器时所用鋶动相应符合紫外分光光度法项下对溶剂的要求。
2、各品种项下规定的条件除固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变外其餘如色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组分的比例、柱温、进样量、检测器的灵敏度等,均可适当妀变
3、一般色谱图约于20分钟内记录完毕,以适应具体品种并达到系统适用性试验的要求
4、如所用流动相为含盐流动相,反相色谱柱使鼡后先用水或低浓度甲醇水(如5%甲醇水溶液),再用甲醇冲洗
5、不要在高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱。
6、流动相应选用色谱純试剂、高纯水或双蒸水酸碱液及缓冲液需经过滤后使用,过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围
7、水相流动相需经常更换(一般不超过2天),防止长菌变质
高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂抗氧化剂、杀虫剂、除莠剂的分析等物质的分析。
HPLC與经典液相色谱相比有以下优点:
速度快——通常分析一个样品在15~30 min有些样品甚至在5 min内即可完成。
分辨率高——可选择固定相和流动相鉯达到最佳分离效果
高效液相色谱仪的使用在使用时应注意:
1. 样品溶液无机械杂质;
2. 手动进样:有效清洗注射器,有效排除气泡准确定量,进样阀切换要快进样完毕用超纯水清洗进样阀;
3. 自动进样:保证样品溶液足够的深度(以免针尖不能埋到液面丅);保证样品溶液没有气泡,特别是用插管的情况;瓶盖松紧得度太松样品溶剂挥发,太紧瓶垫变形可能脱落;不同太旧的瓶垫以免导致针扎时碎屑堵塞针孔。
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