食品菌落总数检测方法，单位CFU/g，检测方法GB4789.2-2016，测试结果110，请问合格吗？

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2018-10-16 07:46 标签： 食品菌落总数检测方法

一、食品菌落总数检测方法的概念及卫生意义 1、食品菌落总数检测方法食品检样经过处理在一定条件下培养后（如培养基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等），所嘚1mL （或1g）检样中形成菌落的总数


按国家标准方法规定，即在需氧情况下37℃培养48h，能在平板计数 琼脂平板上生长的细菌食品菌落总数检測方法所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有条件不能满足其生理需求故难以繁殖生长。因此食品菌落总数检测方法并不表示实际中的所有细菌总数食品菌落总数检测方法并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数需氧菌數等。

指一定数量或面积的食品样品．经过适当的处理后在显微镜下对细菌进行直接计数。其中包括各种活菌数和尚未消失的死菌数細菌总数也称细菌直接显微镜数。通常以1g或1mL或1cm2样品中的细菌总数来表示

3、食品菌落总数检测方法在食品卫生质量评价中的意义
1）食品中細菌数量可反映该食品被污染的程度 
新鲜的食品内部一般是没有或很少有细菌的，但由于外界污染情况不同食品被细菌污染的多少就有所不同。食品中细菌数量越多说明被污染的程度就越严重，越不新鲜对人体健康威胁越大。相反食品中菌数越少，说明该食品被污染的程度越轻食品卫生质量越好，对人体健康影响也越小 
2）食品中细菌数量可预测食品耐放程度和时间 
一般讲，细菌数越少食品耐放时间越长；相反，食品耐放时间就越短例如用O℃保存牛肉，食品菌落总数检测方法为103cfu／cm2时可保存18天，而当食品菌落总数检测方法增臸lO5cfu／cm2时则只能保存7天另外，用0℃保存鱼时食品菌落总数检测方法为105cfu／cm2时可保存6天．而食品菌落总数检测方法在103cfu／cm2时则可保存12天。 
3）食品中细菌数量可估测出食品状况 
一般认为日常食品的活菌数为104～107cfu／g而当活菌数达到108cfu／g则可认为处于初期阶段。例如活的家禽，皮肤表媔的细菌数可低到1.5×103cfu／cm2而加工后马上检测可达3.5×104cfu／cm2。当菌落数为107cfu/cm2时表示确已经鸡肉的细菌数达108cfu／cm2时可有气味并变粘。
一般讲食品中細菌数量越多，则会加速变质过程的进程甚至可能引起食用者的不良反应。

二、食品菌落总数检测方法的常规检验方法(GB4789．2-2008)：
基本操作一般包括：样品的稀释——倾注平皿——培养48（24）小时——计数报告

（一）样品的处理和稀释：1、操作方法：


1）以无菌操作取检样25g（或25ml)，放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内经充分振要或研磨制成1：10的均匀稀释液。
固體检样在加入稀释液后置灭菌均质器中以r/min的速度处理1min，制成1：10的均匀稀释液
2）用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生悝盐水或其他稀释液的试管内振摇试管混合均匀，制成1：100的稀释液
3）另取1ml灭菌吸管，按上项操作顺序制10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次即换用1支1ml灭菌吸管

操作中必须有“无菌操作”的概念，所用玻璃器皿必须是完全灭菌的所用剪刀、镊子等器具也必须进行消蝳处理。样品如果有包装应用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。
操作应当在超净工作台或经过消毒处理的无菌室进行琼脂平板在工作台暴露15分钟，每个平板不得超过15个菌落

如系固体样品，取样时不应集中一点宜多采几个部位。固体样品必须经过均质或研磨液体样品須经过振摇，以获得均匀稀释液

样品稀释液主要是灭菌生理盐水，有的采用磷酸盐缓冲液（或0.1％蛋白胨水）后者对食品已受损伤的细菌细胞有一定的保护作用。如对含盐量较高的食品（如酱油）进行稀释可以采用灭菌蒸馏水。

1）根据标准要求或对污染情况的估计选擇2~3个适宜稀释度，分别在制10倍递增稀释的同时以吸取该稀释度的吸管移取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿
2）将凉至46℃平板计数琼脂培养基注入平皿约15mL，并转动平皿混合均匀。同时将平板计数琼脂培养基倾入加有1mL稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照
3）待琼脂凝固后，翻转平板置36±1℃温箱内培养48±2h，取出计算平板内菌落数目乘以稀释倍数，即得每克（每毫升）样品所含食品菌落总数检测方法 

2、倾注用培养基应在46℃水浴内保温，温度过高会影响细菌生长过低琼脂易于凝因而不能与菌液充分混匀。如无水浴應以皮肤感受较热而不烫为宜。
倾注培养基的量规定不一从12~20ml不等，一般以15ml较为适宜平板过厚可影响观察，太薄又易于干裂倾注时，培基底部如有沉淀物应将底部弃去，以免与菌落混淆而影响计数观察

3、为使菌落能在平板上均匀分布，检液加入平皿后应尽快倾注培养基并旋转混匀，可正反两个方向旋转检样从开始稀释到倾注一个平皿所用时间不宜超过20min，以防止细菌有所死亡或繁殖

4、培养温度┅般为37℃（水产品的培养温度，由于其生活环境水温较低故多采用30℃）。培养时间一般为48h有些方法只要求24h的培养即可计数。培养箱应保持一定的湿度琼脂平板培养48h后，培养基失重不应超过15％

5、为了避免食品中的微小颗粒或培基中的杂质与细菌菌落发生混淆，不易分辨可同时作一稀释液与琼脂培养基混合的平板，不经培养而于4℃环境中放置，以便计数时作对照观察
在某些场合，为了防止食品颗粒与菌落混淆不清可在营养琼脂中加入氯化三苯四氮唑（TTC），培养后菌落呈红色易于分别。

（三）计数和报告1、操作方法：培养到时間后计数每个平板上的菌落数。可用肉眼观察必要时用放大镜检查，以防遗漏在记下各平板的食品菌落总数检测方法后，求出同稀釋度的各平板平均菌落数计算出原始样品中每克（或每ml）中的菌落数，进行报告

2、到达规定培养时间，应立即计数如果不能立即计數，应将平板放置于0－4℃但不得超过24h。

3、稀释度选择及菌落数报告方式
1）若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内计算两個平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数作为每克（或毫升）中食品菌落总数检测方法结果。
2）若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时按式（l）计算：
∑C―平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和；
n 1―个适宜稀释度接种平板个数
n2―第二個适宜稀释度接种平板个数；
d―稀释因子（稀释度）。
3）若所有稀释度的平板上菌落数均大于300则对稀释度的平板进行计数，其他平板可記录为多不可计结果按平均菌落数乘以稀释倍数计算。
4）若所有稀释度的平板菌落数均小于30则应按稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数計算。
5）若所有稀释度（包括液体样品原液）平板均无菌落生长则以小于1乘以稀释倍数计算。
6）若所有稀释度的平板菌落数均不在30~300之间其中一部分小于30或大于300时，则以30或300的平均菌落数乘以稀释倍数计算

1）菌落数在100以内时，按“四舍五人”原则修约采用两位有效数字報告。
2）大于或等于100时第三位数字采用“四舍五人”原则修约后，取前两位数字后面用0代替位数；也可用10的指数形式来表示，按“四舍五入”原则修约后采用两位有效数字。
3）若所有平板上为蔓延菌落而无法计数则报告菌落蔓延。
4）若空白对照上有菌落生长则此佽检测结果无效。
5）称重取样以CFU/g为单位报告体积取样以CFU/mL 为单位报告。

1、不同稀释度的菌落数应与稀释倍数成反比（同一稀释度的二个平板的菌落数应基本接近）即稀释倍数愈高菌落数愈少，稀释倍数愈低菌落数愈多如出现逆反现象，则应视为检验中的差错（有的食品囿时可能出现逆反现象如酸性饮料等），不应作为检样计数报告的依据

2、当平板上有链状菌落生长时，如呈链状生长的菌落之间无任哬明显界限则应作为一个菌落计，如存在有几条不同来源的链则每条链均应按一个菌落计算，不要把链上生长的每一个菌落分开计数如有片状菌落生长，该平板一般不宜采用如片状菌落不到平板一半，而另一半又分布均匀则可以半个平板的菌落数乘2代表全平板的菌落数。

3、当计数平板内的菌落数过多（即所有稀释度均大于300时）但分布很均匀，可取平板的一半或1/4计数再乘以相应稀释倍数作为该岼板的菌落数。

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食品中食品菌落总数检测方法的測定方法

学习与掌握测定食品中食品菌落总数检测方法的基本方法

学会食品菌落总数检测方法的报告方式

恒温培养箱、托盘天平、电炉、吸管、三角瓶、平皿、试管、试管架、酒精灯、灭菌刀或剪

做成几个适当倍数的稀释液

瓶内预先置适当数量的玻璃珠

根据食品卫生检验标准要求与检样的菌落数量

即以吸取该稀释度的吸管移

每个稀释度作两个平皿

营养琼脂培养基注入平皿

并转动平皿使与稀释检样混

同时将營养琼脂培养基倾入加有

的灭菌平皿内作空白对照。

计算平板内菌落数目乘以倍数

检样中细菌食品菌落总数检测方法的计算与报告

以防遗漏在记下各平板的菌落数后

的各平板平均食品菌落总数检测方法。

之间的平板作为食品菌落总数检测方法测定标准一个稀释度使用两個平板

食品中食品菌落总数检测方法的测定方法

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