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合成多肽药物的合成工艺中关键问题分析
Chinese Journal of New D rugs 2010, 19 ( 2)? 新药申报与审评技术 ?★指导原则解读系列专题 (十六 )合成多肽药物的合成工艺中关键问题分析王　 鹏(国家食品药品监督管理局药品审评中心 ,北京 100038 )　　 [摘要 ] 　
文中主要结合药品注册技术审评过程中遇到的常见问题对《 合成多肽药物药学研究技术指导 原则 》 中合成工艺部分中的一些关键问题进行归纳和分析 ,对本指导原则中的一些技术要求 ,如起始原料的 要求 、 合成工艺申报资料的要求等进行深入和细化的阐述 ,同时对指导原则起草过程中存在争议的一些问题 进行了说明 。 [关键词 ] 　 合成多肽 ; 指导原则 ; 合成工艺 ; 技术要求 [中图分类号 ] R95 　　 [文献标志码 ] C 　　 [文章编号 ] 1003 - 3734 ( 2010 ) 02 - 0102 - 04Ana lysis of key problem s on syn thesis of syn thetic peptide drugsWANG Peng( Cen ter for D rug Eva lua tion, S ta te Food and D rug A dm in istra tion, B eijing 100038, Ch ina )　　 有关合成多肽药物的结构确证和质量研究 , 在 指导原则解读系列专题 (十五 ) 中已有论述 , 本文主 要是结合药品技术审评过程中遇到的一些共性问题 就合成多肽药物的合成工艺研究中的几个关键问题 对《 合成多肽药物药学研究技术指导原则 》 做进一 步解读 。 1　 合成工艺的选择 在日常审评工作中会遇到一些研究者提出这样 的问题 : 多肽合成是采用固相合成工艺好呢 ? 还是 液相工艺好 ? 国家食品药品监督管理局药品审评中 心 ( CDE )更倾向于哪种工艺 ? 液相和固相合成工艺是多肽化学合成的两种主 要合成工艺 。尽管随着技术 、 设备的不断发展 、 完 善 ,多肽的固相合成工艺越来越成熟并逐渐占据了 多肽化学合成的主导地位 , 但液相法是经典的多肽 合成方法 ,具有产物纯度高等优点 ,目前仍然是制备[作者简介 ] 　 王鹏 ,男 ,主管药师 ,主要从事化学药品技术审评研究 。联系电话 : ( 010)
- 545, E 2 mail: wangp @ cde. org cn。 .[ Abstract] 　Based on Guidance on Chem istry, Manufacturing and Controls Studies for Synthetic Pep tide D rugs and the common issues about drug registration, this paper summarized and analyzed key p roblem s on synthesis of pep 2 tide drugs A number of technical requirements, such as the requirements for starting materials and synthesis infor 2 . ma tion, were deep ly clarified, and controversial issues in the p rocess of drafting the guidance were described. [ Key words] 　 technical requirem ent102 　中国新药杂志 2010 年第 19 卷第 2 期多肽甚至蛋白质的重要方法 。因此 , 无论是在实际 的药物研究工作中还是在指导原则中都不可能简单 地区分两种工艺的好与坏 。研究者必须在充分了解 两种工艺优缺点的基础上 ,根据目标肽的特点 、 合成 的实际需要以及研究者自身的研制条件 、 经验等选 择合适的制备工艺 。其中有 3 点需要特别关注 : 第一 ,研究者必须充分了解固相和液相两种工艺 的优缺点 。指导原则对此有相对比较详细的表述 ,总 结起来 :液相工艺的优点是每步中间体均可以纯化 , 可以得到高纯度的产品 ,缺点是费时费力 ,自动化程 度不高 ;固相工艺恰好相反 ,其优点是能够实现自动 化 ,缺点是由于每步的中间体不能纯化 ,粗品的纯度 不如液相合成产物 ,需要有可靠的分离 、 纯化手段 。 第二 ,基于合成方法的不同 ,通常认为液相合成 法较适于合成短肽 ,固相合成法更适于合成中 、 长肽。 但是这也并不绝对 ,例如随着固相合成工艺的成熟和 普及 ,现在很多只有 4, 5 个氨基酸的短肽也采用固相 法制备 ,一些长肽为解决困难序列 、 纯度等问题则先 采用液相方法合成短肽片断 ,然后将该片断应用到固Chinese Journal of New D rugs 2010, 19 ( 2)相合成中。因此 ,研究者需根据目标肽的特点和自身 试验条件、 试验经验等选择合适的制备工艺。 第三 ,过去曾认为液相合成法可以大规模合成 , 而固相合成法受树脂载量等因素的影响 , 合成规模 一般不大 。但近年来随着固相合成技术 、 设备的不 断提高 、 完善 ,固相合成法的产量也可以达到公斤级 甚至更高 ,合成规模的问题正在逐步得到解决 。 2　 合成策略 表面上看 , 肽键的形成只是一个简单的羧酸与 胺之间形成酰胺键的过程 。但是由于每一个氨基酸 既含有氨基同时又含有羧基 ,如果活化一种氨基酸 , 则其可以与同一种或另一种氨基酸分子的氨基反 应 ,此外一些氨基酸 (如 Ser, Thr, Tyr, A sp 等 ) 的侧 链官能团也能够参与反应 , 这使得肽合成变得更加 复杂 。因此 ,合成策略的选择是多肽合成工艺研究 的核心工作 ,很多情况下需要深思熟虑地进行规划 。 多肽的合成策略通常是指目标肽肽链的组装方 法以及肽键形成的步骤顺序和保护方法 , 其中需要 α α 关注的技术问题非常繁杂 , 如 N 2 基 、 2 基以 氨 C 羧 及侧链官能团的保护与脱除 ,常见的保护基及特点 , 保护基的匹配 ,如何控制副反应和消旋化等 。鉴于 本指导原则定位于“ 原则性要求 ”因此指导原则只 , 是强调了“ 多肽合成的研究中不仅需要关注活化方 法、 偶联方法等 , 更要关注保 护 /脱 保护 策略的 选 择 ”而没有涉及过多的技术细节 。但是作为药品 , 注册研究来说 ,研究者需重点关注如下几方面内容 : ①从战略角度 , 要根据目标肽的序列等情况研究 、 选择肽链的组装方法 , 例如是采用线性合成还是选 择片段缩合的方法 , 研究者需充分了解这两种方法 各自的优缺点 。限于篇幅本文不做详细的介绍 。 ②选择适当的缩合方法 。在室温下 ,一个氨基酸的 羧基与另一个氨基酸氨基的反应产物是铵盐而不是 酰胺 ,因此事先需要对羧基组分进行活化 。目前 ,可 用于肽键缩合的试剂和缩合方法较多 , 常见的有酰 基叠氮物法 、 酸酐法 、 碳二亚胺法 、 活化酯法 、 磷f盐 试剂法 、 脲f盐试剂法等 。这些缩合方法及缩合试 剂均具有各自的特点 ,例如 : 叠氮法通常被认为是消 旋化倾向最小的缩合方法 ; 碳二亚胺化合物中的 DCC 相对便宜曾经是优选的缩合剂 , 但其具有较高 的消旋化和 C 端差向异构化倾向 ; 而 DCC 与辅助试 剂 HOB t等联合应用能够有效地抑制消旋化等问 题 ,再度得到了广泛应用 ; 磷f盐试剂中的 BOP 是 一种非常有效的缩合剂 , 但反应中易产生具有强毒 性和 致 癌 性 的 HM PA; 脲 f 盐 试 剂 中 的 TBTU 和HBTU 的缩合产率高 , 并且能够减少甚至排除消旋和副反应的发生 。研究者需要充分了解这些缩合方 法的特点 ,再结合目标肽的具体情况 (包括氨基酸 侧链的情况 ) 选择适宜的缩合方法 , 研究资料中应 明确缩合方法的选择依据 。 ③ 保护 /脱保护策略 。 官能团的保护和脱保护是多肽化学合成的基础 , 是 决定多肽合成成功与否的关键因素 。对于 C 端 →N α α 端合成策略来说需要对 N 2 基 、 2 基 (液相合 氨 C 羧 成法或固相合成连接臂 ) 以及多种侧链官能团等大 量官能团进行保护 ,同时由于对选择性的要求不同 , 必须区分临时性保护 (如下一步要反应的氨基或羧 基 )和半永久性保护 (侧链官能团 ) , 临时性保护基 的脱除要保证不干扰已形成的肽键和侧链的半永久 性保护基 ,而最终去除半永久性保护基也要保证组 合起的肽链不受影响 , 此外还需关注的是保护基的 引入和脱除存在发生消旋的可能 。因此 , 尽管目前 已经有优选的 Boc /Bzl 和 Fmoc / tB u 策略 , 保护 /脱 保护策略仍然是多肽化学合成中最为复杂和困难的 问题之一 ,任何一部关于合成多肽的专著中都会用 大量篇幅重点介绍保护 /脱保护策略 。 本指导原则由于指导思想和篇幅的所限并未对 保护 /脱保护策略的技术问题进行深入探讨 ,但是作 为药品注册研究 ,保护 /脱保护策略的研究和选择是 必不可少的部分 ,申报资料中必须予以体现。研究者 应重点说明保护基的匹配问题 ,要求每一类保护基 (临时保护基和半永久性保护基 )的脱除互不相干。 目前 , Boc /B zl和 Fmoc / tB u 策略已成为优选的 保护 /脱保护策略 ,据统计 80%以上多肽合成应用了 这两种方法 ,很多研究者认为采用这两种策略就不必 再进行研究。实则不然 ,因为至今还没有一种普遍适 用的 、 理想的保护基 ,而且 Boc /Bzl和 Fmoc / tB u 策略 本身都有各自鲜明的优缺点 。在合成长肽或含困难 序列的肽时常常还会将两种策略结合应用 。 除上述内容外 , 多肽的合成策略还涉及诸如固 相合成中树脂的选择 、 连接臂的选择 、 二硫键形成方 法等很多领域 ,这些都需要开展针对性的研究工作 。 需要特别说明的是 , 本部分内容由于篇幅所限 并未区分固相和液相合成方法 。 3　 消旋化的控制 “ 消旋化 ” 在有机化学中是指单个光学异构体 完全转变为消旋体 ,而在肽化学中“ 消旋化 ” 也常常 用于表示 1 个手性中心部分或全部差向异构化 , 而 不管反应中生成的是非对映异构体混合物还是对映 异构体混合物 。103 　　中国新药杂志 2010 年第 19 卷第 2 期Chinese Journal of New D rugs 2010, 19 ( 2)尽管本指导原则未对控制多肽合成中的消旋化 提出明确的要求 ,但是鉴于消旋化对于多肽合成和 纯化工艺的重要性 , 从化学药物合成工艺控制的一 般原则来说 ,研究者必须对多肽合成工艺中的消旋 化问题进行研究并提出明确的控制方法 。这是由于 除甘氨酸外的 α2 基酸均为手性分子 , 参与多肽合 氨 成的官能团均连接在手性中心上 , 它们参与的所有 反应 (如保护基的引入和脱除 、 羧基的活化反应等 ) 都存在消旋化的可能 。对于一个 10 肽 ,如果每个氨 基酸仅发生 1%的差向异构化 , 则合成终产物的光 学纯度就只有 90. 4% ,而对于一个 50 肽 , 其光学纯 度则仅有 60. 5% ,从而会影响到肽的生物活性 。由 于将差向异构体从终产物中有效分离是一个非常繁 琐的事情 ,因此在肽合成过程中就必须采取相应措 施、 加强过程控制 ,将消旋化降至最低 。通常需关注 缩合方法 、 保护 /脱保护策略的选择 , 加强对缩合试 剂、 投料比 、 反应条件等的考察研究 。此外 , 还应注 意合成原料 ―― ― 各种保护氨基酸的控制 , 建议采用 有效手段控制其光学纯度 。 4　 分离和纯化 与普通化学合成药物相比 , 多肽合成工艺中产 生的杂质来源非常广泛 ,如缺失肽 、 断裂肽 、 氧化肽 、 差向异构体 、 侧链酰基化 、 二硫键交换的产物等 , 而 很多杂质与目标肽本身的性质非常接近 , 因而分离 和纯化工艺的可行性就显得尤为重要 。为此 , 本指 导原则用了相对比较多的篇幅对“ 分离和纯化 ” 的 方法 、 研究内容等进行了阐述 。而在实际工作中 ,我 们发现很多研究者对多肽的分离纯化工艺不够重视 , 提供的资料非常简单 ,尤其是很多申报资料未提供分 离纯化方法的验证资料 ,或者是研究得不充分 ,从而 导致无法对该分离纯化方法的可行性进行评价 。 事实上 ,指导原则已经明确要求研究者在注册申 报资料中必须提供 : ①详细的纯化工艺。 ②相关的 工艺参数。 ③详细的纯化工艺的验证资料。这其中 纯化工艺的验证资料最为重要 ,是说明多肽纯化工艺 可行性的关键环节 。纯化工艺的验证一般可通过比 较纯化前后样品的纯度来进行 ,申报资料中需要提供 样品纯化前后的纯度研究图谱和相应的纯度数据。 需要强调的是 : ①纯化前后样品纯度的对比研 究需要以可行的杂质分析方法为基础 。 ② 纯化前 多肽粗品的纯度应符合合成多肽的一般规律 。例 如 ,一个接近 40 个氨基酸残基的多肽采用固相工艺 合成 ,研究者提供 HPLC 图谱显示纯化前粗肽的纯 度高达 80%以上 。然而 ,采用固相合成工艺制备含104 　中国新药杂志 2010 年第 19 卷第 2 期有 40 个氨基酸残基的多肽 , 要使总收率达到 80% , 其每一步得率均需超过 99. 5% ,这在实际生产中是 很难做到的 ,这种情况会提示粗品纯度检查方法的 专属性不够理想 ,不能充分检出粗品中存在的各种 杂质 。正是基于此 , 合成多肽杂质研究方法通常也 会用粗肽来对方法的专属性进行验证 。 总之 , 分离纯化工艺验证研究的目的是要说明 所采用的工艺能够有效地分离 、 去除合成中产生的 各种杂质和副产物 , 注册申报资料应围绕该目的提 供翔实的试验数据 。 5　 合成所用氨基酸的要求 氨基酸及其衍生物 (通常是保护氨基酸 ) 作为 多肽合成的起始原料 , 其质量对合成多肽的质量有 重要影响 ,例如保护氨基酸的纯度如果为 99% , 那 么合成一个 10 肽 ,纯化前仅由起始原料引入的杂质 就会高达 10% ,因此研究者应特别关注氨基酸及其 衍生物的来源 、 质控方法等 。申报资料中 ,一是要提 供氨基酸的来源及相关证明文件 , 二是要提供氨基 酸的质量标准和检验报告 。指导原则对氨基酸的质 量标准有明确的要求“ 作为起始原料的氨基酸及其衍 生物的质量标准一般应包括性状、 熔点、 比旋度、 化学 纯度 、 色谱纯度及光学纯度、 含量等 ,其中对于起始原 料的化学纯度和光学纯度的控制尤为重要 。 ” 需要特别关注保护氨基酸光学纯度的控制问 题 。在本指导原则征求意见阶段 , 关于是否要求控 制合成所用氨基酸的光学纯度的问题就存在较多争 论 ,企业界的代表认为实施起来难度较大 。课题组 经多次讨论并充分征求国内权威专家意见 , 认为合 成起始原料氨基酸的光学纯度对终产品质量具有明 显影响 ,同时也参考了 FDA , EM EA 的相关技术要求 并充分考虑到国内目前保护氨基酸的质量情况 , 最 终在本指导原则的定稿中还是保留了相关要求 。在 实际工作中 ,国内多数研究者采用测定比旋度的方 法控制氨基酸的光学纯度 ,但是受专属性 、 灵敏度等 的限制 ,比旋度无法有效控制氨基酸的光学纯度 ,尤 其是对于比旋度数值较小的保护氨基酸更是如此 , 如 Fmoc 2Glu (O tB u ) 2 为 + 1. 2 °Fmoc 2Gln ( Trt) 2 OH , OH 为 - 1. 0 ° 。因此 ,建议采用手性 HPLC 法控制起 始原料的光学纯度 。 6　 注册申报资料中的常见问题 从实际审评工作来看 , 在合成多肽注册申报资 料的合成工艺部分除了前文所述的工艺研究和工艺 验证工作不充分之外 (例如未对纯化工艺等进行研 究、 验证 ,未提供保护 /脱保护策略 、 缩合方法的选择Chinese Journal of New D rugs 2010, 19 ( 2)依据和必要的研究资料等 ) , 最常见的问题就是提 供的合成工艺不够详细 , 主要表现为提供的工艺步 骤和操作过程过于简单 、 工艺参数不够全面 、 过程控 制方法不够详细 。 以固相合成制备生长抑素为例 , 有些合成工艺 表述为 : 以 ××× 树脂起始 ,按照多肽的氨基酸序列 进行固相合成 ,顺序连接 Ser, Thr……A la,以 20%六 氢哌啶 /二氯甲烷为脱保护剂 , ××× 为缩合试剂 ; 用 ××× 为切割剂 ,将直链肽从树脂上切割下来 ; 在 ××× ,直链肽经 ×× 中 氧化生成二硫键形成环肽 , 得到生长抑素粗品 …… 这样的工艺资料看似包含了 合成工艺的整个过程 , 但事实上评价者很难对该工 艺的可行性做出准确判断 ,因为它缺少太多的细节 , 例如没有说明树脂的用量及溶胀洗涤方法 、 脱保护 、 缩合反应的具体方法等 。 根据相关指导原则的要求 , 结合多肽合成的具 体特点 ,多肽的固相合成工艺资料应包括 : ① 如果 各个氨基酸缩合工艺完全一致 , 应至少要提供一个 合成循环的详细合成工艺及工艺参数 , 包括氨基酸 的用量 、 树脂的用量及处理方法 、 脱保护的详细方法 (次数 、 时间 、 洗涤情况等 ) 、 缩合反应的详细方法 (缩合剂用量 、 反应时间 、 洗涤情况等 ) 等 。 ② 如果 某个氨基酸的缩合方法有所变化 , 如缩合时间等具 体的工艺参数不同 、 需要进行二次或三次缩合 、 由于 一些困难序列需要进行封闭等 , 申报资料中必须明 确说明 。 ③如果第一个氨基酸需要通过酯键 、 酰胺 键或酰肼键等与树脂连接 , 应提供该步骤的详细合 成工艺 。 ④应提供详细的裂解 、 二硫键形成 、 纯化 、 干燥过程的工艺及工艺参数 , 如纯化工艺应提供柱 填料种类及粒径 、 色谱柱的直径 、 流动相组成 、 上样　 (上接第 97 页 )量、 检测波长 、 、 流速 色谱条件 ,并详细说明组分收集 的选择标准 、 其他组分的处理方式等 。 ⑤ 提供详细 的过程控制方法 。如缩合反应 、 二硫键连接等反应 终点的监控 。 对于液相合成工艺 , 由于在合成中会用到不同 的缩合方法及脱保护技术 , 因此应详细说明合成中 的每一步操作以及反应终点监控等过程控制方法 , 尤其是分离纯化工艺 。 7　 结语 由于组成的特殊性 , 合成多肽药物的合成工艺 具有与普通化学药物明显不同的特殊之处 , 本文只 是根据指导原则起草过程中遇到的一些问题并结合 药品技术审评过程中的一些体会尝试对《合成多肽 药物药学研究技术指导原则 》 以及合成多肽药物合 成工艺研究中的部分关键问题进行解读 , 希望能够 使这部指导原则更好地服务于研究者 。 最后还需要说明的是 ,与其他指导原则一样 ,本 指导原则不可能穷尽合成多肽药物合成工艺研究领 域内的所有问题 ,研究者还需根据药品研究的一般 规律 、 针对各自品种的特点开展全面的研究工作 。[ 　 　 　 　 　] 参 考 文 献[1 ]　 国家食品药品监督管理局 . 合成多肽药物药学研究技术指导原则 [ S ]. 2007.[ 2 ] 　N. 休厄德 , H. D. 贾库布克 . 肽 : 化学与生物学 [M ]. 北京 : 科学出版社 , 2005.[3 ]　 彭师奇 . 多肽药物化学 [M ]. 北京 : 科学出版社 , 1993. [ 4 ] 　NA I SL , AKERS MJ. 蛋白质药物 ―― L ― 开发与生产 [M ]. 北京 :化学工业出版社 , 2006.[5 ]　 王军志主编 . 生物技术药物研究开发和质量控制 [M ]. 北京 :科学出版社 , 2003. 编辑 : 王宇梅 /接受日期 : 2009 - 10 - 09于哪类化合物 ,有助于剂型的选择和化合物特性的 认知 , 有利于对药物进行综合评价 。 ② 晶型 、 粒度 的研究 。在药物研发中常常会忽视 , 对于水溶性不 好的药物 ,晶型和粒度对药物的毒性和疗效有一定 的影响 ,对此进行深入的研究有助于药物的开发 。 ③灭菌工艺条件 。药物的灭菌工艺对药物的安全 性影响很大 ,因此在进行药物工艺研究应对灭菌工 艺条 件 进 行 全 面 深 入 的 研 究 , 确 保 药 物 的 质 量 。 ④杂质限度的依据 。如何确定杂质的限度 ,是创新 药物开发的关键环节 ,需要结合药物安全性的数据 , 并结合化合物的特点 ,综合判断以确定合理的限度 , 可参考相关的指导原则 。 ⑤ 稳定性研究 。应关注影响产品质量的包装密封系统方面的变化 , 这是保 证药物质量的重要方面 。 4. 4 　 上市后阶段 药品批准上市后 , 鉴于种种原因 , 药品的处方 、 工艺 ,原辅料的来源 、 规格等方面会发生相应的变 更 ,具体要求参照即将发布的《已上市化学药品变 更研究的技术指导原则 》 。 以上是笔者在创新药物 CMC 审评中的一些思 考 ,希望能对药物的研究有一定的参考作用 ,如果有 不妥之处也希望批评指正 。编辑 : 王宇梅 /接受日期 : 2009 - 03 - 18105 　　中国新药杂志 2010 年第 19 卷第 2 期
物质研究是合成多肽药物药学研究的一项重要内容,由于合成多肽本身结构、合成工艺...关物质研究提出了原则性的要求,本文主要 是根据审评中遇到的一些共性问题就合成...合成多肽药物药学研究技术指导原则一、前言多肽类化合物是一类重要的生物活性分子...类药物在制备方法、 结构确证、质量研究等方面又有与一般药物不同的独特问题。...合成多肽药物药学研究技术指导原则介绍
目录一、前言 二、合成多肽药物药学研究的基本考虑 三、合成多肽药物药学研究的主要内容 (一)制备工艺研究 (二)...为客户进行竞争分析,发展规划,投资决策提供支持和依据,本项目在运作 过程中得到了众多合成多肽药物产业链各个环节技术人员及营销人员的支持和 帮助,在此一并表示谢意...性研究报告在企 业贷款中的作用在企业的各种外源融资渠道中,银行贷款是最重要的...第五章多肽药物大规模合成技术项目技术工艺方案 5.1 项目产品、规格及生产规模 ...如要投诉违规内容,请到百度文库投诉中心;如要提出功能问题或意见建议,请点击此处进行反馈。 2013版用于立项多肽药物大规模合成技术项目可行性研究报告(甲级资质)审查...前景以及对研究现代疾病的预防和治疗发挥着至关重要...研究内源性小分子对发病过程中的某些环节的调控, ...以化学合成方法研制开发多肽 类药物,已成为广泛采用...E.全合成与内源性多肽的结合正确答案及相关解析
正确答案 B
解析 磷酸可待因是以吗啡为起始原料,将吗啡中的3位羟基进行甲基化反应制得的,故属于半合成代用品...E.全合成与内源性多肽的结合正确答案及相关解析
正确答案 C
解析 盐酸哌替啶相对于吗啡而言,结构简单,可化学全合成制备,故是中枢镇痛药巾的全合成代用品。...而可生物降解微球在药物投递过程中可有效改善上述问题, 它特有的载药 方式能够...④ 化学合成多肽蛋白质研究样品具有广阔市场。化学合成众多多肽蛋白质 研究样品以...
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需要合成几条5-10个氨基酸的多肽，以前没有做个这方面的实验，想请问一下各位战友。需要达到的目的就是：多肽合成后固定在某个物质如树脂、磁珠，然后放到96孔板或其他小的培养孔上面，加入样品后，样品中的目的成分被多肽吸附后，在吸出样品检测样品中的目的成分是不是明显的减少了。
问了2家公司说多肽不好固定起来。 请问各位高手觉得理论上有没有可能，或是知道那些公司能做推荐一下，谢谢！
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很好固定啊，哪会固定不上
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可以固定的，氨基、巯基都能够进行偶联的。我比较熟悉的是巯基偶联，在多肽上接一个半胱氨酸，然后通过巯基连接到巯基胶上
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谢谢两位战友的回复，有问题再请教。
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您知道已知一个氨基酸想要合成多肽的软件吗？
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。。。难么，
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我是做多肽合成的，欢迎来询仅仅是技术问题来咨询也是完全没问题滴
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这个帖子发布于10年零222天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我要做跨膜蛋白LDL受体的抗体,想通过多肽合成的方法获得多肽,然后免疫动物..网上查不到做LDLR多肽合成的信息资料,我决定选择该蛋白的胞外部分的配体结合域的某一段序列进行合成,问题:1.如何确定所选片段的抗原决定簇是否合适2.多肽合成中的mer是什么意思(比如octamers,nonamers)3.网上做抗原表簇预测时所出现的MHC type 是什么意思,我该如何选择?4.网上预测是否SCORE越高,越值得选择?总之我如何才能确定我所合成的 多肽可以用于免疫动物获得抗体??我是新手,请指教...
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mer代表聚的意思，比如说dimer是二聚体的意思nonamers是九聚体的意思
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MHC type表示主要组织相容性复合体的型号，它分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类分子。
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fenghui234 MHC type表示主要组织相容性复合体的型号，它分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类分子。这对于我们选择多肽段有什么意义呢??
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既然你不能精确定位抗原决定簇，为什么不考虑选择重组蛋白抗原呢？
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if888 既然你不能精确定位抗原决定簇，为什么不考虑选择重组蛋白抗原呢？重组蛋白抗原怎么做??
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你抗体所抗的抗原是什么蛋白你应该清楚，用基因工程方法把这个蛋白表达出来就行了，如果这方面工作需要帮助你可直接联系我。
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