天天象棋楚汉争霸第六十六关怎么过？请高手指点。_百度知道
天天象棋楚汉争霸第六十六关怎么过？请高手指点。
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1. 车四进九
2. 马二退四
3.车八进二
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太给力了，你的回答完美地解决了我的问题，非常感谢！
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出门在外也不愁100道门第18关怎么过？求高手指教_百度知道
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两根手指同时按住白点往上拉，当然白点是不动的，你只要同一时间同一速度拉，就可以过了
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谢啦，这问题迷惑我好久了啊，呵呵
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出门在外也不愁好帮网_棋牌麻将-第1页
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有关POD的问题，求各位高手指教！
我做的实验有三种植物的POD测出来是负值，千日红、银边草和太阳花，请问有相关研究的吗？能否帮忙告诉测出负值的原因和解决办法呢？求赐教！:work:
我在第一次测定POD的时候也出现过负值，但是只是局限于第一次。第二次再测得时候数据就没有哦出现过负值。第一个可能就是手生，不熟练。再一个就是测定过程中出现误差，导致出现负值，给你一份详细的POD测定方案以及测定过程中的注意事项。仔细看看.经供参考。
二&&愈创木酚过氧化物酶（POD）活性的测定----愈创木酚法
【实验原理】
　　　在过氧化物酶催化下，H2O2将愈创木酚氧化成茶褐色产物。此产物在470nm处有最大光吸收，故可通过测470nm下吸光值变化测定过氧化物酶活性。
【仪器、材料与试剂】
（一）仪器
　　　1. 分光光度计& &&&2. 台式离心机
（二）材料
　　　1. 磷酸氢二钠　2. 磷酸二氢钠
　　　3. 2-甲氧基酚　4. 30％H2O2
　　　5. 陶瓷小研钵　6. 2ml 离心管
（三）试剂
　　　1.&&0.2mol/L磷酸缓冲液(pH6.0)：
　　　A母液：0.2mol/L磷酸氢二钠溶液: 取Na2HPO4·12H2O（分子量358.14）71.7g；
　　　B母液：0.2mol/L磷酸二氢钠溶液：取NaH2PO4·2H2O（分子量156.01）31.2g。
分别用蒸馏水定容到1000ml。
0.2mol/L磷酸缓冲液(pH6.0)的配制：分别取A母液(Na2HPO4 )12.3ml和B母液(NaH2PO4 ) 87.7ml混匀即为100ml PBS(0.2M，pH6.0)；
【实验步骤】
　　　1. 酶液提取&&
　　　称取0.2g（可视情况调整）样品（新鲜叶片或根系）洗净后置于预冷的研钵中，分三次加入1.6ml （0.6 ml、0.5 ml、0.5 ml）50mmol/L预冷的磷酸缓冲液（pH7.8）在冰浴上研磨成匀浆，转入离心管中在4℃、12000g下离心20min，上清夜即为酶粗提液。
　　　2. 酶活性测定
　　（1）反应混合液的配制：取50mlPBS（pH6.0，0.2M）缓冲液于烧杯中，加入28μl愈创木酚（2-甲氧基酚）于磁力搅拌器上加热搅拌，直至溶解愈创木酚溶解，待溶液冷却后加入19μl 30％的H2O2，混匀后保存于冰箱中备用。
　（2）酶活性测定：取3ml反应液并加入40μl酶液后测定OD470值在40秒的变化。以PBS代替酶液为对照调零，
　　　3. 计算结果
　　　以每min OD值变化（升高）0.01为1个酶活性单位（u）。，按下式计算活性
　　　POD活性=（ΔA470×Vt）/（W×Vs×0.01×t）& &(u/g FW)
ΔA470：为反应时间内吸光度的变化；W为样品鲜重(g)；t为反应时间(min)；Vt为提取酶液总体积（ml）；Vs为测定时取用酶液体积（ml）。
【注意事项】
　　　1.&&反应液配制时由于愈创木酚难溶，应加热一段时间。加入H2O2前注意溶液冷却，防止H2O2的挥发。
　　　2.&&由于该反应迅速，加入酶液要立即进行吸光值的测定。
J.L. Muñoz-Muñoz, F. García-Molina, P.A. García-Ruiz, E. Arribas, J. Tudela, F. García-Cánovas, J.N. Rodríguez-López, Enzymatic and chemical oxidation of trihydroxylated phenols, Food Chemistry, Volume 113, Issue 2, 15 March 2009, Pages 435-444
F. Quintanilla-Guerrero, M.A. Duarte-Vázquez, B.E. García-Almendarez, R. Tinoco, R. Vazquez-Duhalt, C. Regalado, Polyethylene glycol improves phenol removal by immobilized turnip peroxidase,Bioresource Technology, Volume 99, Issue 18, December 2008, Pages
1. 酶液提取&&
　　　称取0.2g（可视情况调整）样品（新鲜叶片或根系）洗净后置于预冷的研钵中，分三次加入1.6ml （0.6 ml、0.5 ml、0.5 ml）50mmol/L预冷的磷酸缓冲液（pH7.8）在冰浴上研磨成匀浆，转入离心管中在4℃、12000g下离心20min，上清夜即为酶粗提液。
& &楼主您好！请问一下“预冷的磷酸缓冲液（pH7.8）”这个溶液怎么制取？
（2）酶活性测定：取3ml反应液并加入40μl酶液后测定OD470值在40秒的变化。以PBS代替酶液为对照调零，
& && && && && && &再问一个，“40μl酶液”是上文“上清夜即为酶粗提液”中的酶粗提液吗？ : Originally posted by 我的LJ at
1. 酶液提取&&
　　　称取0.2g（可视情况调整）样品（新鲜叶片或根系）洗净后置于预冷的研钵中，分三次加入1.6ml （0.6 ml、0.5 ml、0.5 ml）50mmol/L预冷的磷酸缓冲液（pH7.8）在冰浴上研磨成匀浆，转入离心管中在 ... PH7.8的磷酸缓冲液是22.875mlA母液+2.125mlB母液，定容至100ml，再多的话同比例增加。放4℃冰箱里几个小时候就是预冷了。
40μl酶液就是酶的那个上层清液 : Originally posted by haha at
PH7.8的磷酸缓冲液是22.875mlA母液+2.125mlB母液，定容至100ml，再多的话同比例增加。放4℃冰箱里几个小时候就是预冷了。
40μl酶液就是酶的那个上层清液... 谢谢！原来是这样的:D : Originally posted by 凌浩 at
我在第一次测定POD的时候也出现过负值，但是只是局限于第一次。第二次再测得时候数据就没有哦出现过负值。第一个可能就是手生，不熟练。再一个就是测定过程中出现误差，导致出现负值，给你一份详细的POD测定方案以及 ... 请问一下楼主，你有没有用紫外吸收法测定CAT 的详细方法啊？ : Originally posted by Miss木子 at
请问一下楼主，你有没有用紫外吸收法测定CAT 的详细方法啊？... CAT的测定我一直都是用的这个方法，你看跟你的额一样不？如果一样的话，还可以讨论一下……
【实验原理】
过氧化氢酶(Catalase,CAT),是一种广泛存在于生物组织中的氧化还原酶，它能催化H2O2分解为水和氧气,清除组织中的过氧化氢。H2O2在240nm处有一个吸收高峰,其吸光度与H2O2的含量成正比,过氧化氢酶能分解过氧化氢,使反应溶液吸光度(A240)随反应时间而降低。单位时间内吸收的差值就是过氧化氢酶的活性。
【仪器、材料与试剂】
（一）仪器
1. 分光光度计
2. 台式离心机
（二）材料
植物叶片等植物材料
（三）试剂
1&&0.15mol/L磷酸缓冲液（pH7.0）： 取A母液(Na2HPO4) 228.75 ml 和B母液(NaH2PO4) 146.25 ml混合后用蒸馏水定容至500ml。
2&&0.3％H2O2: 吸取0.5ml 30％的H2O2，用PBS (pH7.0)定容至50ml。
【实验步骤】
1. 酶液提取&&
称取0.2g（可视情况调整）样品（新鲜叶片或根系）洗净后置于预冷的研钵中，分三次加入1.6ml （0.6 ml、0.5 ml、0.5 ml）50mmol/L预冷的磷酸缓冲液（pH7.8）在冰浴上研磨成匀浆，转入离心管中在4℃、12000g下离心20min，上清夜即为CAT粗提液。
2 酶活性测定
（1）反应混合液的配制：取100ml PBS（0.15M，pH7.0），加入0.1546ml 30%的H2O2摇匀即可。
（2）取2.9 ml反应液加入0.1ml酶液，以PBS为对照调零，测定OD240值在40s内的变化。
3 结果计算：酶活性计算：以每min OD值减少0.01为1个酶活性单位（u）。
CAT=/（W×Vs×0.01×t）& & (u/g FW)
ΔA240：为反应时间内吸光度的变化；W为样品鲜重(g)；t为反应时间(min)；Vt为提取酶液总体积（ml）；Vs为测定时取用酶液体积（ml）。 : Originally posted by 凌浩 at
CAT的测定我一直都是用的这个方法，你看跟你的额一样不？如果一样的话，还可以讨论一下……
【实验原理】
过氧化氢酶(Catalase,CAT),是一种广泛存在于生物组织中的氧化还原酶，它能催化H2O2分解为水和氧气,清除组 ... 你好，感谢你的分享，我有两个问题：1、”加入0.1546ml 30%的H2O2摇匀即可“，加入的是30%的H2O2吗？那为什么还要配制0.3%的H2O2？
2、调零的PBS，PH是7.8的那个吗？期待回复:D : Originally posted by
你好，感谢你的分享，我有两个问题：1、”加入0.1546ml 30%的H2O2摇匀即可“，加入的是30%的H2O2吗？那为什么还要配制0.3%的H2O2？
2、调零的PBS，PH是7.8的那个吗？期待回复:D... 调零的PBS应该是pH7.0那个 : Originally posted by
你好，感谢你的分享，我有两个问题：1、”加入0.1546ml 30%的H2O2摇匀即可“，加入的是30%的H2O2吗？那为什么还要配制0.3%的H2O2？
2、调零的PBS，PH是7.8的那个吗？期待回复:D... 请问你做出来了吗？我也想知道到底是30%的呢还是0.3%的请赐教。感激不尽。 您好！你测的那几种酶？测的怎么样了？ 请问一下，要是我用液氮研磨的话会影响结果吗？？？？ : Originally posted by
您好！你测的那几种酶？测的怎么样了？ 你也测这几个酶吗？亲?可以互相学习一下哈。加我qq