elisa试剂盒哪家好法预试需要设定复孔吗

用于ELISA法的一种高精度自动操作移液器设计原理(可编辑),移液器原理,移液器工..
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用于ELISA法的一种高精度自动操作移液器设计原理(可编辑)
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3秒自动关闭窗口审稿意见求助,关于ELISA法,谢谢! - 论文投稿 - 小木虫 - 学术 科研 第一站
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审稿意见求助,关于ELISA法,谢谢! 作者:
paper审稿意见回来了,其中有一点不是很明白,请各位大虾帮帮忙,先谢谢了!!!!我的论文里有个实验是用ELISA法(不是用试剂盒)测定血清中流感病毒特异性抗体IgG的含量,方法如下:
用流感病毒液(病毒滴度为105.0 TCID50/mL)包被96孔板,4℃下保存16h。在包被孔中加入50μl 的1%小牛血清-含0.05%吐温20 PBS溶液(PBST),然后分别加入50μl不同稀释度的小鼠血清,设复孔、阴性对照,37℃下培养1h。用PBST洗三次,加入l:200 HRP标记的羊抗小鼠lgG抗体,培养1h后用PBST洗板,每孔加入50μl的OPD-H202底物显色,用H2SO4终止反应。空白调零后,在酶标仪上测定各孔的光密度(405 nm)。然后我将各组的OD值均数作图放在结果上。
审稿人提出 “data should not be presented as OD but rather in absolute values (i.e. pg/ml or IU)”
我以前没做过ELISA,这个实验如果要测出病毒特异性抗体的含量,应该是要用特异性抗体(明确含量)的血清做标准曲线吧?但是这样是不是要纯化病毒特异性抗体呢?还是用普通的小鼠抗体IgG加入血清做标准曲线即可呢?
有哪位虫友做过这方面的实验呢?
1.审稿人提出的问题的意思是:你在文中表述数据结果的时候不应该是OD值,应该是你测定的目标抗体的含量,就是要把你测定的OD值根据标准曲线计算成抗体含量(单位用pg/ml或者是国际单位)2.你关于标准曲线的疑惑:你的目的是要测定流感病毒特异性抗体,所以你肯定要用流感病毒特异性抗体(已知浓度)来坐标准曲线。 这一点我能肯定。另外,是不是需要纯化的病毒特异性抗体,从理论上来说,应该是要纯化的,但是我没有做过。这一点我不能确定。抱歉。
:Originally posted byjiezibeilinat
13:40:33:1.审稿人提出的问题的意思是:你在文中表述数据结果的时候不应该是OD值,应该是你测定的目标抗体的含量,就是要把你测定的OD值根据标准曲线计算成抗体含量(单位用pg/ml或者是国际单位)2.你关于标准曲线的疑惑 ... 如果是要用病毒的特异性抗体就郁闷了,从血清里分离病毒特异性抗体到做标准曲线,估计等我把这部分工作做完,也得半年了,因为以前没做过...如果我坚持用OD值,不做标准曲线了,我又担心直接被拒掉了,哎
最好不要用OD值,或者你用抑制率来表示呢?
:Originally posted bygrandstoneat
16:33:33:最好不要用OD值,或者你用抑制率来表示呢? 我的药是增强免疫的,不能用抑制率吧?而且用抑制率怎么回答审稿人呢?谢谢
不是这个意思,是以一个值为基准,其他值与这个值的比值,从而体现了相对的一组数值,因为OD值每次测试肯定是不一样的,但是相对数值是近似的
:Originally posted bygrandstoneat
19:14:05:不是这个意思,是以一个值为基准,其他值与这个值的比值,从而体现了相对的一组数值,因为OD值每次测试肯定是不一样的,但是相对数值是近似的 哦,好的,谢谢!
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