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F1期:舢年』月必学位论文版权使用授权书本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权山西医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时,署名单位仍然为山西医科大学。(保密论文在解密后应遵守此规定) ,论文作者签名:指导教师签名:R期:赳年上月/6/&R同期:?巫早年』月强同(本卢明的版权门山两医科人学所有,朱经许可,任何单位及任何个人不得擅臼使用)目录中文摘要…………………………………………………………………………I英文摘要……………………………00 0 00 0 O OO O O O OOO O OO……………………………II英文缩略词索引…………………………………………………………………Ⅳ正文··&#(来源：淘豆网[/p-2606951.html])183;··一·一··········”··········一·························一·····……····…··OOO OO O E001前言…···…···………···…··(来源：淘豆网[/p-2606951.html])·······…DOO O O O OOOOOO···………···…···………·…··1刖舌”一””‘一””””””一””一““”””一“……”一…”………“…·1材料和方法……0 00 0 0 0 0 0 0 00 0…………………………OOO OO O OOO…………………3结果··················0 0 0 00 0 00 0 0 0 0 00 0 00 0 000···········&(来源：淘豆网[/p-2606951.html])#183;·········OO O OOO·····················9讨论……·····················OOO O OO··········…·····O O O O 00···&#(来源：淘豆网[/p-2606951.html])183;·······················1 1结论····································……····……·········…·&(来源：淘豆网[/p-2606951.html])#183;··一··········一··13参考文献……………Oo Oooo…………………………………………………14附I习…···························…··························(来源：淘豆网[/p-2606951.html])·················“.1 6综述··…················…···…·········…·····…·····················&#1(来源：淘豆网[/p-2606951.html])83;···············1 7正文···········-··········…····…··……·····…···O O OOOO···············O O O O OO·····&(来源：淘豆网[/p-2606951.html])#183;1 7参考文献………………………OO OOOO………………………………………23个人简介………………………………………………………………………26致谢······························································&(来源：淘豆网[/p-2606951.html])#183;··················2 7山西医科大学磺士学位论文∞.3鱼油脂肪乳对重症急性胰腺炎大鼠肠粘膜屏障功能的影响中文摘要背景:重症急性胰腺炎(SAP)是临床上常见的危急重症,其来势凶猛,发病机制复杂,病程进展迅速死亡率高达200/o..30%。近年来大量研究表明,在SAP的疾病发展过程中,肠粘膜屏障功能损害起着极为重要的作用。故如何保护肠粘膜屏障功能成为SAP救治成功与否的关键所在。∞.3鱼油脂肪乳具有良好的炎症反应调节作用,进一步探究其作用机理及对SAP时肠粘膜屏障功能的影响,对SAP的治疗有着不可估量的价值。目的:观察重症急性胰腺炎(SAP)大鼠经∞.3鱼油脂肪乳剂静脉注射治疗后,肠粘膜屏障组织学改变及其通透性的变化,探讨∞.3鱼油脂肪乳对重症急性胰腺炎大鼠肠粘膜屏障的保护作用。方法:将48只SD雄性大鼠随机分为三组,即等渗盐水组(A组),假手术组(B组)和鱼油治疗组(C组),每组16只。通过手术造模,确保SAP大鼠模型成功后,A、C组大鼠经尾静脉注射分别给予生理盐水和鱼油,数小时后进行腹主动脉采血并处死大鼠。之后测定大鼠血清肿瘤坏死因一a(TNF.a)、C.反应蛋白(CRP)浓度及血浆二胺氧化酶(DAO)活性。给药后同时收集尿液,检测尿中乳果糖/甘露醇比值。取血后及时取胰腺及小肠组织HE染色并进行病理学评分。实验完毕后收集各项指标并进行统计学分析。结果:C组大鼠血清肿瘤坏死因子.a(TNF—a)及C.反应蛋白(Cl心)浓度明显低于A组(P&0.05),但高于B组(P&0.05)。鱼油组和生理盐水组比较∞.3鱼油脂肪乳能降低血浆二胺氧化酶(DAo)活性及尿中乳果糖/甘露醇比值(P&0.05)。B、C组大鼠肠黏膜损伤程度较轻,小肠炎症学评分较A组低(P&0.05)。结论:SAP大鼠早期肠粘膜屏障通透性增高,功能遭到破坏。经∞.3多不饱和脂肪酸治疗后炎症反应明显减弱,肠粘膜组织得到修复,肠粘膜屏障功能有所改善。关键词:to-3多不饱和脂肪酸;鱼油;重症急性胰腺炎;肠粘膜屏障;二胺氧化酶山西医科大学硕士学位论文∞.3 fish oil emulsion on severe acute intestinal barrier functionAbstractBackgroundSevere acute pancreatitis(SAP)is mon clinical emergency and severe,and its ferocious,the pathogenesis plex disease progresses rapidly,the mortality rate as high as 20%to 30%.In recent years alarge number of studies have shown that the disease in the SAP developmentprocess,the intestinal barrier dysfunction plays anextremely important role.Therefore,how toprotect the intestinal mucosal barrier function as SAP where the key to ESS.∞一3 fish oilemulsion has agood regulation of the inflammatory response,and further explore the mechanismand the intestinal mucosal barrier function when the SAP impact on the treatment of SAP hasinestimable value.ObjectiveObservation of severe acute pancreatitis(SAP)rats were o)-3 fish oil intravenous fat emulsionafter treatment,histological changes and gut barrier permeability changes of lo-3 fish oilemulsion on severe acutepancreatitis Intestinal barrier in rats.MethodsTo 48 SD male rats were randomly divided into three groups,normal saline group(A group),sham operation group(B group)and fish oil treatment group(C group)16.Modeling throughsurgery to ensure.the ESS of SAP rats,A,C rats were given intravenous injection of salineand fish oil,a few hours after the abdIominal aortic blood and rats were killed.Determination ofserum levels of tumor necrosis after the due-a(TNF-a),C-reactive protein(CRP)concentrationand plasma diamine oxidase(DAO)activity.Urine was collected after administration to detecturinary lactulose/mannitol ratio.Promptly after blood pancreas and small intestine tissue HEstaining and the pathological score.After the collection ofexperimental and statistical analysisofthe indicators.ResunsC serum levels of tumor necrosis factor-a(TNF-a)and C-reactive protein(CRP)weresignificantly lower than the A group(P&O.05),but higher than B group(P&O.05).Fish oil groupand the saline group∞一3 fish oil emulsion to reduce plasma diamine oxidase(DAO)activity andurinary lactulose/mannitol ratio(P&O.05).B,C group to a lesser extent in intestinal mucosa,intestinal inflammation score of lower than A group(P&O.05).SAP increased permeability of rat intestinal mucosa barrier,functional destroyed.The∞·3U山西医科大学磺士学位论文polyunsaturated fatty acids significantly reduced inflammatory response after treatment,intestinal tissue have been restored,improved intestinal barrier function.Key words CO-3 polyunssevediamine oxidase山西医科大学硕士学位论文英文缩略词索引英文缩写英文全名SAPCOX.2IL.6TNF.a中文全名severe acutepancreatitis 重症急性胰腺炎cyelooxygenase·2interleukin.6tulnor neerosis faetor-a环氧合酶.2白细胞介素.6肿瘤坏死因子.aSIRS systemic inflammatory response syndrome 系统性炎症反应综合征BTlETMlBFMOFSTCPLA2PUFAsDAOELISAHEbacterial translocation 细菌易位intestinal endotoximia 肠源性内毒素血症intestinal barrier function an failure 多器官功能衰竭sodium tauro cholate 牛磺胆酸钠phospholipaseA2 磷脂酶A2polyunsat urated fatty acids 多不饱和脂肪酸diamine oxidas 二胺氧化酶enzyme-linked immunosorbent assay 酶联免疫法hematoxylin and eosin 苏木精和伊红山西医科大学硕士学位论文(I)一3鱼油脂肪乳对重症急性胰腺炎大鼠肠粘膜屏障功能的影响.●上—JL日lJ 置重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis SAP)是外科常见的急腹症,来势凶猛,病情进展迅速,尽管目前医疗水平有了大幅度的提高,但SAP的死亡率依然高达30%0.3】。自1901年oPie提出“共同通道学说&以来,“胰酶激活、胰腺自身消化学说&一直被认为是AP发病的经典机制,AP的治疗也围绕着如何减少胰酶产生,避免胰酶激活而进行。然而,这种治疗并未达到所希望的目的。因此,传统的“胰酶自身消化学说”己不能很好地解释AP的发病与转归。近年来的研究发现直接威胁AP患者的不是胰腺坏死,而是与肠道细菌移位(bacterialtranslocation BT)及其产生的内毒素吸收入血所形成的肠源性内毒素血症(intestinaendotoximia IETM)以及胰腺组织坏死的发展及继发细菌感染有很大关系。研究表明,AP患者于发病后一周,胰腺的坏死感染率可高达24%,随后渐升,同时胰周坏死组织所分离出来的细菌证实主要是来自消化道的G.需氧茵,其中以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌最常见。用质粒标记的大肠杆菌证明了AP状态下肠道细菌可穿过肠粘膜到达肠系膜淋巴结及胰腺。说明在AP状态下肠道细菌发生了移位且参与了胰腺坏死组织的继发感染。正常情况下,肠道中含有的500余种常驻细菌,由于受到肠粘膜屏障功能的阻碍,它们难以突破肠粘膜到达肠外组织。AP状态下细菌发生移位,说明肠粘膜屏障功能存在一定程度的损伤。实验研究结果业已表明,肠粘膜屏障功能(intestinal barrier function,IBF)受损是导致肠道细菌发生移位与IETM形成的重要因素。肠粘膜屏障损伤继发细菌易位和内毒素血症,进而导致胰腺组织中以中性粒细胞为主的炎性细胞的广泛浸润,激发肿瘤坏死因子.a(TNF.a)、白细胞介素.I(IL.1)、IL.6,IL.8等细胞因子和细胞间粘附分子.I(IcAM.I)、血管细胞粘附分子一I(vcAM.1)等粘附分子以及趋化因子等的过度表达,通过“扳机样作用&触发炎症介质的“瀑布样级联反应&而使SAP炎症扩散、恶化,产生严重的全身炎症反应综合症(SIRs),累及诸多胰腺外器官,引发急性呼吸窘迫综合征(ARDs)和多器官功能障碍综合征(MODS)以致死亡。肠道在重症急性胰腺炎时,合成大量的细胞因子等炎症介质,一方面则促使全身炎症反应不断扩大,另一方面加重肠道屏障功能衰竭。肠道粘膜屏障功能受损后肠道细菌易位,引起SIRS和MODS,是重症急性胰腺炎后期感染和败血症的主要原因,即重症急性胰腺炎的“二次打击&理论。故如何降低肠粘膜屏障通透性,抑制肠道的炎症反应,促进肠粘膜组织修复,从而更好地维护肠粘膜屏障功能成为SAP临床治疗中的棘手问题。∞.3鱼油脂肪乳来源于深海鱼油。主要成分为∞-3多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFAs),包括二十碳血烯酸(EPA)山西医科大学硕士学位论文和二十二碳六烯酸(DHA),是一种重要的免疫调理性营养素,鱼油不仅能降低血循环中TNF.仅、IL.6的水平,而且也能使小肠粘膜中TNF.a mRNA的表达显著下降。既往研究已证明,在重症感染病人营养支持的同时,添加含∞.3脂肪酸的鱼油,有助于减轻机体的炎性反应,同时可减轻感染对小肠粘膜所造成的损伤,对小肠粘膜产生保护作用。∞.3鱼油脂肪乳是否能减轻重症急性胰腺炎时炎症水平,对肠粘膜屏障产生修复保护作用,以及作用机制如何正是本实验的出发点。本实验采用SD雄性大鼠制作SAP模型,观察重症急性胰腺炎时肠粘膜屏障的损伤程度,以及通过各项指标检测肠粘膜屏障的通透性,旨在探讨∞.3鱼油脂肪乳对重症急性胰腺炎大鼠肠粘膜屏障功能的影响及其作用机制,为重症急性胰腺炎的治疗开阔道路。2山西医科大学硬士学位论文材料与方法1实验对象1.1动物雄性SD大鼠,体重215-2459(购自山西医科大学实验动物中心)1.2试剂1.牛磺胆酸钠购于Sigma公司;2.;鱼油(尤文)由无锡华瑞制药有限公司提供。3.大鼠血浆肿瘤坏死因子一a(TNF—a)检测ELISA试剂盒购自美国ADL公司4.C反应蛋白(Cl冲)试剂盒由南京建成生物公司提供5.DAO(二胺氧化酶)试剂盒由南京建成生物公司提供。6.乳果糖、甘露醇、阴阳离子树脂均为Fluca公司产品。1.3一般器材10mi灌胃针1只、lml针管、5ml针管、50ml针管、0.90氯化钠注射液、医用酒精耗材均购自山西莱宝生物有限公司,手术器械由山西医科大学普外科实验室提供,病切片制作和染色所需仪器设备和试剂由山西医科大学第一临床医院病理科提供1.4实验仪器及设备..1.Leica公司RM2135型病理石蜡切片机2.北京医疗设备厂产品WSZ.1 34—75型电热恒温培养箱3.医用烧烤微波炉4自动脱水机、自动染片机5低温冰箱德国西门子公司产品6微量吸管7分析天平仪北京赛多利斯仪器系统有限公司产品80LYMPUS光学显微镜R本olympus公司产品9高速离心机德国sigma公司产品播放器加载中，请稍候...
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