求QQ飞车喷法，飞车高手来！.....如题 谢谢了_百度知道
求QQ飞车喷法，飞车高手来！.....如题 谢谢了
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漂移分 为10种：普通漂移，最佳漂移，short漂移，cutting漂移（断位漂移）, 连飘，双喷，C式连喷，D式连喷，LINK连喷, 点漂
（本讲解都以向右漂为列，+代表有先后顺序）
一.普通漂移:新手学习卡丁最初的漂移
普通漂移指法：
1.↑→shift ( 进入漂移 )
2.←↑ ( 拉回车头 )
3.↑ (松开前进再迅速按下喷火)
二.最佳漂移:这里跟普通漂移指法相同,不同的是,最佳漂移是车轮轨迹几乎平行的漂移,特点是SHIFT按的时间比较短,入弯角度小(入弯前调整,出弯喷火在边角)保持速度快,油比普通漂移少,是双喷与连喷的起步.
三.short漂移:在oRESONo的卡丁车教室里提到的short漂移,即极轻的按shift的漂移,特点是不能喷火,一般用与增加微量的油,以及调整车身,但相比起油来损失速度较大.
四.cutting漂移(断位漂移):在直路上的漂移,特点是在漂移的中途为了大幅度调整车头,而多按了一下SHIFT来调整的漂移.
cutting漂移指法:
1.↑→shift ( 第一次漂移 )
2.←↑ ( 拉回车头 )
3.shift ( 调整车头 )
4.↑ ( 喷火 ).
小技巧:(新手学习此漂移的时候可以在定车身的时候猛按shift等到调整过后按喷火)
五.连飘:即连续漂移,其实很多人在oRESONo的卡丁车教室里看过的连喷(录象字体表示连飘)其实说的就是国内解释的连飘(根据他的指法判断),双喷(录象字体双飘)说的就是国内解释的连喷(根据其指法判断),我不清楚录象是否是韩国的oRESONo所制作,我们的理解跟其录象的理解还是有点差距的,所以在此我想给大家说明下.其实大众化的连飘跟连喷不是一个概念的,连飘就是是连续漂移.
1.↑→shift ( 第一次漂移 )
2.←↑ ( 拉回车头 ) 2,3步骤衔接要快效果才好
3.↑+→shift ( 喷火后立即第二次漂移 )
4.←↑ ( 拉回车头 )
5.↑ ( 喷火 )
六.双喷:说白了就是简单的连喷,不过只喷飘两下,是练习连喷的基础
1.↑→shift ( 第一次漂移 )
2.←↑ ( 拉回车头 ) 3.4步一定要衔接快！
3.→shift ( 第二次漂移 注意！这里是不按↑的 )
4.↑← ( 第一次喷火)
5.↑ (第二次喷火)
七.C式连喷(横冲式连喷):此连喷是最容易练习的连喷 C式连喷指法:
1.↑→shift ( 第一次漂移 )
2.←↑ ( 拉回车头 ) 3.4步一定要衔接快！
3.→shift ( 第二次漂移 注意！这里是不按↑的 )
4.↑+← ( 第一次喷火,必须是先按↑再按←)
5.→shift ( 第三次漂移 )
6.↑+← ( 第二次喷火，必须是先按↑再按←)
7.↑ ( 第三次喷火 )
八.D式连喷(斜冲式连喷): D式连喷的指法:
1.↑→shift ( 第一次漂移 )
2.←↑ ( 拉回车头 ) 3.4步一定要衔接快！
3.→shift ( 第二次漂移 注意！这里是不按↑的 )
4.↑← ( 第一次喷火,必须同时按↑←)
5.→shift ( 第三次漂移 )
6.↑← ( 第二次喷火，必须同时按↑←)
7.↑ ( 第三次喷火 )
九.LINK漂移(直冲式连喷)又名双喷式连喷:此连喷在实战中意义不大,但练习起来难度却很大. LINK漂移指法:
1.↑→shift ( 第一次漂移 )
2.←↑ ( 拉回车头 ) 3.4步一定要衔接快！
3.→shift ( 第二次漂移 注意！这里是不按↑的 )
4.←+↑ ( 第一次喷火,必须是先按←再按↑)
5.→shift ( 第三次漂移 )
6.←+↑ ( 第二次喷火，必须是先按←再按↑)
7.↑ (第三次喷火)
其实上面七八九三种就是三式连喷但是在喷火的时候不同,比较起来漂移的轨迹也会不同
C式连喷第一喷火的时刻是在第二飘后定车身前,最常用的连喷,按物理角度看是平抛过去的喷火,一般在幅度比较大的弯.
D式连喷第一喷火的时刻是在第二票后定车身的同时,C式连喷衍生过来的,按物理角度看是做喷漂同时的斜受力运动,所以称斜冲式连喷.
LINK漂移第一喷火的时刻是在第二飘定车身之后,LINK在操作上比较困难,因为第一下喷火被延迟到二定车身以后了,难免会损失第一下喷火.一般上不用,但是有的时候我们可以看到连续瞬间喷了两下火,那就是LINK漂移.
连喷需要熟练,其实高手的连喷不是一种,而是好几种喷法的结合,随着路线的改变而改变,高速的喷法看其速度的快慢以及路线决定连喷的用法,可以采取复式连喷.新手对连喷掌握的不熟练,有的时候是连飘跟连喷相结合,在路线上也不能贴近,在衔接上比较慢,第一漂最佳化的角度也不太好,容易损失速度,所以学好连喷需要花很长的时间练习。
十.点漂,就是短时间内两次漂移!第一次轻点shift,第二次点久一点就像普通漂移一样!常用于类似高速赛道最后那个直角弯!该漂移的特点是容易集够一个气!一般是在加速的情况下使用此招!把握得好的话不加速也能集满一个气! 谢谢采纳 多多加分
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PCR高手请进，小女子有事相求，我刚来金币不要嫌少啊，我只有这么多啊，全给你了
最近做PCR很受伤，以前P出来的体系做了很多次，出结果的概率很低。中途PCR反应试剂用完了，重新订购的（takara），引物什么的也重新订购的，同样的序列同一个公司。然后重新优化PCR体系，结果如图：1、3、5、7、9是加了模板的，2、4、6、8、10没加，两两体系是一样的除了加模板和没加模板；所有试剂都一样，做了一个Mg离子梯度：2、3、4、5、6微升，原以为找到了原因，今天用6微升Mg离子的做了4批，一管都没有，桑心啊~~~哪位高人可以帮帮我啊，小女子不甚感激啊~~~~~:cry::cry::cry:
& &&&试剂什么的应该没有问题的，因为其他同学做别的分子标记也做得出的。
优化的时候是怎么优化的？是用移液器一个PCR管一个PCR管的加反应试剂，还是配5-10个反应的反应液，然后混合再加；前者单个加，尤其是酶加不准。加6微升镁离子，感觉太多了。
再做一次，注意不能漏加。我看3ul就差不多。 6ul mg？多大体系？通常我的PCR 20ul的话，是2.5ul ~3 ul之间，
看上去你选那个 4 ul的就不错啊。 Troubleshooting discussion is based on the PCR protocol as described in the table below. All reactions are run for 30 cycles. From Yale University
（这个是我以前做等位特异PCR的时候参考过，你可以参照问题3 ）
1. I get (many) longer unspecific products. What can I do? 扩增出比较长的非特异性产物？
Decrease annealing time减少退火时间
Increase annealing temperature升高退火温度
Decrease extension time减少延伸时间
Decrease extension temperature to 62-68& C降低延伸温度到62-68& C
Increase KCl (buffer) concentration to 1.2x-2x, but keep MgCl2 concentration at 1.5-2mM.增加KCl浓度到1.2-2.0倍，但是保持MgCl2浓度在1.5-2.0mM
Increase MgCl2 concentration up to 3-4.5 mM but keep dNTP concentration constant.增加MgCl2浓度到3-4.5 mM，但是保持dNTP浓度不变。
Take less primer减少引物
Take less DNA template减少DNA模板浓度
Take less Taq polymerase少用些Taq酶
If none of the above works: check the primer for repetitive sequences (BLAST align the sequence with the databases) and change the primer(s)如上诉无效果：核对引物的重复序列和换引物
Combine some/all of the above 上诉方法灵活使用
--------------------------------------------------------------------------------
2. I get (many) shorter unspecific products. What can I do? 扩增出比较短的非特异性产物
Increase annealing temperature升高退火温度
Increase annealing time增加退火时间
Increase extension time增加延伸时间
Increase extension temperature to 74-78& C增加延伸温度到74-78& C
Decrease KCl (buffer) concentration to 0.7-0.8x, but keep MgCl2 concentration at 1.5-2mM减少KCl浓度至0.7-0.8倍，但是保持MgCl2浓度在1.5-2mM
Increase MgCl2 concentration up to 3-4.5 mM but keep dNTP concentration constant增加MgCl2浓度到3-4.5 mM但是保持dNTP浓度不变
Take less primer少用引物
Take less DNA template少用模板
Take less Taq polymerase少用酶
If none of the above works: check the primer for repetitive sequences (BLAST align the sequence with the databases) and change the primer(s)同第一问题
Combine some/all of the above
--------------------------------------------------------------------------------
3. Reaction was working before, but now I can't get any product. 反应以前有产物，可是现在不行。
Make sure all PCR ingredients are taken in the reaction (buffer, template, Taq, etc)确保反应所有的成分都存在
Change the dNTP solution (very sensitive to cycles of thawing and freezing, especially in multiplex PCR)更换dNTP溶液
If you just bought new primers, check for their reliability (bad primer synthesis ?)新引物要保持其合成的准确可靠性
Increase primer amount增加引物的量
Increase template amount增加模板的量
Decrease annealing temperature by 6-10& C and check if you get any product. If you don't, check all your PCR ingredients. If you do get products (including unspecific ones) reaction conditions as described above.将退火温度降低6-10& C后核对一下是否有产物，如果没有就确认一下PCR反应的成分是否都存在。如果能获得产物（包括非特异性的产物）然后采取上诉方法。
Combine some/all of the above
4. My PCR product is weak. Is there a way to increase the yield? PCR的产物的量很少，怎样增加产量?
--------------------------------------------------------------------------------
Gradually decrease the annealing temperature to the lowest possible.逐渐降低退火温度到最大可能
Increase the amount of PCR primer增加引物的量
Increase the amount of DNA template增加模板的量
Increase the amount of Taq polymerase增加酶的量
Change buffer (KCl) concentration (higher if product is lower than 1000bp or lower if product is higher than 1000bp)改变buffer中KCL的浓度（增加如果产物少于1000bp，减少如果大于1000bp）
Add adjuvants. Best, use BSA (0.1 to 0.8 &g/&L final concentration). You can also try 5% (v/v, final concentration) DMSO or glycerol.加入辅佐剂。最好用BSA。或者用5%的二甲基亚砜
Check primer sequences for mismatches and/or increase the primer length by 5 nucleotides核对一下一物种错配的，或者增加5个核苷酸
Combine some/all of the above
5. My two primers have very different melting temperatures (Tm) but I cannot change their locus. What can I do to improve PCR amplification? 两个引物的溶解温度非常不一样但不能改变基因座。如何改进？
--------------------------------------------------------------------------------
An easy solution is to increase the length of the primer with low Tm. If you need to keep the size of the product constant, add a few bases at the 3' end. If size is not a concern, add a few bases at either the 3' or the 5' end of that primer.增加低溶解温度的长度。 看不到图，不知道你镁离子的浓度是多少6ul的话，一般是25mm的，再加上你的体系可能是25ul的？那终浓度就是6mm，对于普通PCR来说虽然有点高，但是不至于会扩不出来 : Originally posted by flylove037 at
最近做PCR很受伤，以前P出来的体系做了很多次，出结果的概率很低。中途PCR反应试剂用完了，重新订购的（takara），引物什么的也重新订购的，同样的序列同一个公司。然后重新优化PCR体系，结果如图：1、3、5、7、9 ... 话说我读博士的时候，我老板最看不起国内一些研究生的就是做PCR喜欢优化Mg离子浓度，深以为然。
用哪种酶就用那种酶配的缓冲液，按protocol上给的标准体系和程序加样和反应，除了某些高GC体系需要注意，一般的PCR反应都不会有什么问题。如果出问题了，检查自己的程序是否有错误，检查反应体系中是否加错或者漏加，是否拿错了反应buffer——很容易发生的错误是把dNTP加错，因为有时候也可能用dCTP或者dTTP，以及把buffer加错（默认的缓冲buffer都是带有Mg2+的，但不排除有不带Mg的，这类buffer都会注明-Mg2+）。
别把自己的时间浪费在这种低质量、繁琐的优化上，要相信这部分优化商家已经帮你做好了——以前曾听说有个同学做了两个学期的PCR条件优化，最后写了一篇论文就是关于怎样做好PCR，让人无语。 : Originally posted by wanhscn at
优化的时候是怎么优化的？是用移液器一个PCR管一个PCR管的加反应试剂，还是配5-10个反应的反应液，然后混合再加；前者单个加，尤其是酶加不准。加6微升镁离子，感觉太多了。
再做一次，注意不能漏加。我看3ul就差 ... 体系是先混合再分装的啊，我做的50微升的体系，加6微升一开始我也觉得多，但是就这个图来看，6微升的产物很亮啊 : Originally posted by imfly77 at
话说我读博士的时候，我老板最看不起国内一些研究生的就是做PCR喜欢优化Mg离子浓度，深以为然。
用哪种酶就用那种酶配的缓冲液，按protocol上给的标准体系和程序加样和反应，除了某些高GC体系需要注意，一般的P ... 是因为试了很多情况都做不出来才迫不得已优化的啊，谁会没事找抽搞体系优化啊，我们导师也很藐视方法上的所谓改进的，把这个方法写进文章这种事情是做不出来的，那个只是我们试验中的困难，你举的那个例子就太夸张了。你提的建议有一定的参考价值，因为当时做出来的时候就是按说明书上的体系很轻松就出来了，可是现在又做不出了，却找不出原因，dNTP加错应该不可能，因为我们实验室只有一种，而且我们实验室一直用的是Mg+（-）的这种buffer，直接加了Mg+的buffer也有的，但用的少。感谢你给我这种化繁为简的思路，谢谢！ : Originally posted by cdl007 at
6ul mg？多大体系？通常我的PCR 20ul的话，是2.5ul ~3 ul之间，
看上去你选那个 4 ul的就不错啊。 50的体系，今天的还是没有结果，我把上下游引物跑了一下，现在在等结果，该不会搞了半天是引物合成质量的问题吧:sweat: : Originally posted by love_st at
看不到图，不知道你镁离子的浓度是多少6ul的话，一般是25mm的，再加上你的体系可能是25ul的？那终浓度就是6mm，对于普通PCR来说虽然有点高，但是不至于会扩不出来 多谢关注啊，这个论坛真的不错，大家都很热心帮忙呢，不再是我一个人孤军奋战了，呵呵。我做的是50微升的体系。 坑爹啊，上、下游引物一个亮一个暗:rol: 不行的话楼主就买那种预混的酶吧。比如tiangen公司的taq plus，所有成分都是预先混合在一起的，不用自己优化的。
我感觉现在PCR，跟试剂关系不大，现在的试剂质量那都是相当的好。关键要优化的就是退火温度，引物设计的有没有问题等。 : Originally posted by snoopyzxx at
不行的话楼主就买那种预混的酶吧。比如tiangen公司的taq plus，所有成分都是预先混合在一起的，不用自己优化的。
我感觉现在PCR，跟试剂关系不大，现在的试剂质量那都是相当的好。关键要优化的就是退火温度，引物 ... 嗯，谢谢啊，我以前做PCR都挺好的，我今天跑了一下上下游引物，一个亮一个暗，它这样的浓度不均也对反应有影响的吧 : Originally posted by imfly77 at
话说我读博士的时候，我老板最看不起国内一些研究生的就是做PCR喜欢优化Mg离子浓度，深以为然。
用哪种酶就用那种酶配的缓冲液，按protocol上给的标准体系和程序加样和反应，除了某些高GC体系需要注意，一般的P ... 有道理。看专业。但如果做多倍体物种，以及多倍体物质gene的图位克隆，有些在没有其他可选择的情况下，还是要优化的。 : Originally posted by flylove037 at
是因为试了很多情况都做不出来才迫不得已优化的啊，谁会没事找抽搞体系优化啊，我们导师也很藐视方法上的所谓改进的，把这个方法写进文章这种事情是做不出来的，那个只是我们试验中的困难，你举的那个例子就太夸 ... 也不全是这样的，看学科专业。对于多倍体物种，一个基因有几个同源拷贝的情况下，还是需要优化体系的。新手都需要从优化这步做起。 : Originally posted by flylove037 at
是因为试了很多情况都做不出来才迫不得已优化的啊，谁会没事找抽搞体系优化啊，我们导师也很藐视方法上的所谓改进的，把这个方法写进文章这种事情是做不出来的，那个只是我们试验中的困难，你举的那个例子就太夸 ... 也不全是这样的，看学科专业。对于多倍体物种，一个基因有几个同源拷贝的情况下，还是需要优化体系的。新手都需要从优化这步做起。 话说以我的经验做PCR根本用不去动镁离子浓度，凡事都有主要次要因素，镁离子就是个次要因素，引物状态和参数就是一个主要因素，一次跑个梯度看结果，不行就重新设计条好的引物，普通PCR哪有扩不出来的道理。引物的好坏，绝大多数人以为是primer5或者oligo6给出的参数，实际上那些参数尤其是TM值是不太可信，设计引物重点考察3端6个碱基的状态，因为对整条引物来说只有这6个碱基才会被聚合酶所覆盖从而延伸。楼主既然以前扩出来，现在同样的东西就扩不出来，如果排除你实验操作或者试剂差错，我严重怀疑引物的实际效率，也就是说引物本身状态不稳当，导致PCR反应极易受到各种因素的影响，所以时又时无。 : Originally posted by cyz at
话说以我的经验做PCR根本用不去动镁离子浓度，凡事都有主要次要因素，镁离子就是个次要因素，引物状态和参数就是一个主要因素，一次跑个梯度看结果，不行就重新设计条好的引物，普通PCR哪有扩不出来的道理。引物的 ... 高手就是高手，确实是引物的问题，我昨天把上下游引物跑了一下，结果一条亮一条暗，原液浓度就不一样，这样的话是不是证明我扩不出引物是罪魁祸首啊 : Originally posted by wanhscn at
也不全是这样的，看学科专业。对于多倍体物种，一个基因有几个同源拷贝的情况下，还是需要优化体系的。新手都需要从优化这步做起。 嗯，谢谢，我懂了，要分情况的，呵呵~~~谢谢~~~再送你一朵花~~~ 向师兄师姐们学习！！！
var cpro_id = 'u1216994';
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