Sso7d蛋白融合修饰技术的新一代定量PCR超混液 | BIO-RAD - 生物通
Sso7d蛋白融合修饰技术的新一代定量PCR超混液
融合了Sso7d蛋白后，使聚合酶在复制DNA时在模板上滑动时获得了一个牢固的把手。
patents 6,627,424; 7,541,170; and 7,560,260.
Bio-Rad专利的Sso7d蛋白融合修饰技术首先被应用于经典的iProof™高保真酶产品线，Bio-Rad将经Sso7d蛋白融合修饰的聚合酶应用于Ssofast™系列超混液，使兼备高灵敏度、高扩增效率和稳定重现性的快速定量PCR成为现实。
Sso7d蛋白是一个双链DNA序列非特异性结合蛋白，经与其的融合，使聚合酶和模板的结合能力得到很大提高，从而提高了聚合酶的连续合成率，极大地加快了PCR的反应速度，从而减少了完成扩增所需的反应时间。而且，经Sso7d蛋白融合修饰的聚合酶对于PCR抑制剂的抵抗能力得到了很大提升，从而使该Ssofast系列超混液成为从未经纯化的样品进行直接定量PCR的理想选择。
Ssofast 新一代荧光定量PCR 超混液包包有礼
活动时间：日――日
活动内容：活动期间，凡购买如下产品1000RXN包装一个即可获赠登山包一个。
Ssofast Evagreen 超混液
Ssofast Evagreen with low ROX 超混液
Ssofast 探针法超混液
Ssofast with ROX 探针法超混液
SsoFast™ EvaGreen&
200 x 20 μl reactions
SsoFast™ EvaGreen&
500 x 20 μl reactions
SsoFast™ EvaGreen& Supermix
1000 x 20 μl reactions
使用创新型聚合酶的Ssofast 系列超混液使您可在30分钟内获得出色的定量PCR结果。
将人脾脏cDNA从10ng到100ag进行10倍梯度稀释，用定量PCR检测其中的18S RNA，反应体系为20ul.（18S RNA扩增效率=101.8%，r = 0.997，反应运行时间为29分钟。RFU，相对荧光单位）
Ssofast Evagreen超混液具有出色的灵敏度，使您足以检测到单拷贝的目标基因。
使用定量PCR分别检测从10ng到80pg (■)系列稀释和3.2pg (■)的人基因组DNA中的ZAP70，ZAP70的扩增效率=102.7%，r = 0.991。插入的小图为标准曲线。RFU,
相对荧光强度。
Ssofast Evagreen超混液出色的重现性，可有效区分及高重现性地定量1.33 倍系列稀释的模板。
CBP基因可有效扩增不同起始量的人基因组DNA（5ng到500pg），从左至右依次为(■) 5 ng, 2.83 ng、1.60 ng、903 pg和511 (■) 3.76 ng,、2.13 ng,、1.20 ng 和679 pg.。CBP 扩增效率 = 96.5%, r = 0.996. 从插入小图可见该实验出色的辨识度及重现性。RFU, 相对荧光单位。
SsoFast™ EvaGreen&
Supermix With Low ROX
200 x 20 μl reactions
SsoFast™ EvaGreen&
Supermix With Low ROX
500 x 20 μl reactions
SsoFast™ EvaGreen& Supermix With Low ROX
1000 x 20 μl reactions
快速循环条件下展现出宽泛的动态范围
SsoFast™
supermix with low ROX中的聚合酶在ABI I 7500快速定量PCR系统上，使用快速定量PCR程序，表现出出色的动态范围
7500 fast系统上，SsoFast EvaGreen supermix with low ROX展现出稳定的定量PCR结果。在20ul的反应体系中检测10倍系列稀释的cDNA(10
ng to 100 fg), A,检测人脾脏cDNA 中的α-tubulin f
(α-tubulin efficiency = 105.8%, r = 0.996; total qPCR run time = 39 min,
不含熔解曲线); B,
,检测人肝脏cDNA 中TIP
(TIP efficiency = 92.7%, r = 0.992; total qPCR run time = 42 min, 不含熔解曲线).
宽达6个数量级的动态范围
SsoFast™ EvaGreen& supermix with low ROX 用于ABI 7500 快速定量PCR系统，表现出宽达6个数量级的动态范围 将Hela细胞cDNA 进行十倍系列稀释（100 ng to 100 fg ），检测其中18S rRNA的含量，（ 18S rRNA efficiency = 98.6%, r2 = 0.999.）
SsoFast™ Probes
200 x 20 μl reactions
SsoFast™ Probes
500 x 20 μl reactions
SsoFast™ Probes Supermix
1000 x 20 μl reactions
复杂状况下的双重定量PCR表现
使用SsoFast™ 探针法超混液在CFX96™实时荧光定量PCR仪检测两个目标基因的表达水平
每20ul反应体系中加入100ng的人肝脏组织的cDNA，A, HEX 标记的GAPDH 探针法单重定量PCR(■); B, Texas RedC标记的
IL-2探针法单重定量PCR (■); C,
HEX-标记的 GAPDH GAPDH 和(■) Texas RedC标记的 IL-2进行的探针法双重定量PCR (■).
Panel D 将上述3个扩增曲线在同一框图中进行展示，以观察是否有(Cq)的差异，从中可以看出，无论对于高表达水平的的基因(GAPDH)还是地表达水平的基因(IL-2)，在双重定量PCR和单重定量PCR中，其（Cq）均没有差异。Total qPCR run time = 38 min. RFU, 相对荧光读数
Exceptional
Stability for High-Throughput qPCR
soFast™ probes supermix 在CFX自动化工作站上表现出出众的稳定性
进行十倍系列稀释，在20ul反应体系中检测GAPDH的表达水平，所有的反应都组装后放入CFX自动工作站，循环条件如下： 95°C， 10 min, （95°C,15 秒, 60°C,
60 秒）35个循环。每块板检测结束后，间隔2小时以使最后一块板和第一块板的时间间隔为48小时。其中5块板的实验结果如下：.
RFU,相对荧光单位。
Start Time
PCR Efficiency
稳定的重现性和定量区分度
SsoFast™ probes supermix表现出出色的重现性
可清晰地区分和稳定地定量1.33倍系列稀释的起始模板。
从不同起始量的HeLa 细胞cDNA
(1 ng to 100 pg)中扩增GAPDH基因. 从左至右依次为: (■) 1 ng, 565 pg, 320 pg, 181 pg,
and 102 (■) 752 pg, 425 pg, 240 pg, and 136 pg. GAPDH efficiency = 91.5%, R2 = 0.997. 插入小图标出不同稀释度的标准曲线。qPCR时间为 50 分钟， RFU, 相对荧光单位.
不同扩增条件下都展现出杰出的性能
SsoFast™ probes supermix 在不同扩增条件下都表现出杰出的性能结果。 将Hela细胞的cDNA进行从100ng到1pg进行10倍系列稀释，在20ul体系中检测α-tubulin
，RFU, 相对荧光单位。&具体循环条件如下：
Cycling Protocol
qPCR Run Time
Fast 2-step
Standard 2-step
Standard 3-step
SsoFast™ Probes
Supermix With ROX
200 x 20 μl reactions
SsoFast™ Probes
Supermix With ROX
500 x 20 μl reactions
SsoFast™ Probes Supermix With ROX
1000 x 20 μl reactions
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